Agarose poederis een organische stof met de chemische formule c24h38o19. Het is een wit of geel kraalachtig geldeeltje of poeder, dat een lineair polymeer is, en de basisstructuur is 1,3 gekoppelde - D-galactose en 1,4-gekoppelde 3,6-endother-l-galactose zijn afwisselend gekoppeld.
Agar-pectine is een heterogeen mengsel dat uit veel kleinere moleculen bestaat. Agarose wordt over het algemeen verwarmd tot boven de 90 graden om op te lossen in water, en wanneer de temperatuur daalt tot 35-40 graden, vormt het een goede halfvaste gel, wat het belangrijkste kenmerk en de basis is van de verschillende toepassingen. De prestatie van agarosegel wordt gewoonlijk uitgedrukt door de sterkte van de gel. Hoe hoger de sterkte, hoe beter de prestaties van de gel.
Agarose poeder, afgekort als Ag, is een ongeladen neutraal bestanddeel van agar, ook wel vertaald als agarose of agarose. De chemische structuur van agarose is verbonden door 1,{2}} D-galactose en 1,4-gekoppelde 3,6-endother-l-galactose zijn afwisselend gekoppeld.
Agarose is afgeleid van het polysacharide van rode algen en het hoofdbestanddeel is polygalactose, waarvan ongeveer 70% agarose en 30% agarose met vertakte keten is. Agarose heeft een lineaire structuur en wordt doorgegeven door D-galactose en 3,6-gedehydrateerde galactose - 1, 4 en - 1, 3 kruispunten vormen afwisselend herhalende disacharide-eenheden. Agarose met vertakte keten werd geëxtraheerd uit - 1, drie bindingen scheiden een andere keten. Het materiaal dat met heet water uit zeewier wordt gewonnen, bevat ongeveer 40% agar. In de handel verkrijgbare agar (algemeen bekend als agar) heeft vaak de vorm van een vel of een los touw en wordt meestal gebruikt als eetbare kauwgom, verpakkingsmiddel voor medicijnen of bacteriekweekmedium. Zuivere agarose wordt in biochemische laboratoria vaak gebruikt als halfvaste drager bij elektroforese, chromatografie en andere technologieën voor de scheiding en analyse van biologische macromoleculen of kleine moleculen.
Het productieproces van agarose kan in vier delen worden verdeeld: voorbehandeling, extractie, DEAE-cellulosebehandeling en dehydratatie
1) De voorbehandelde poedervormige grondstoffen worden direct 1/2 uur bij 80°C gedroogd. de strip- en blokgrondstoffen worden gewassen met water, in kleine stukjes gesneden en ingebakken
2) Extractie: na roeren en extraheren met een gemengde esteroplossing van azijnzuur-natriumacetaat gedurende enkele uren, het water afzuigen, wassen, vervolgens roeren en gedurende enkele uren extraheren met natriumcarbonaat-natriumbicarbonaat-bufferoplossing, en vervolgens pompen, filteren en wassen met water
3) De door de bufferoplossing geëxtraheerde agargel wordt opgelost in een 4%-oplossing door verwarming met water, en vervolgens toegevoegd aan DEAE-cellulose om gedurende 3-4 uur onder hittebehoud te roeren, en vervolgens gecentrifugeerd. Het filtraat wordt verzameld en gefiltreerd om een witte oplossing in colloïdale toestand te verkrijgen
4) Dehydratatie: voeg na het verwarmen van het witte filtraat snel 95% ethanol toe onder roeren totdat er geen duidelijke neerslag meer is, koel het af tot kamertemperatuur, giet de oplossing van de bovenste laag uit, was en droog het neerslag om het product te verkrijgen, met een opbrengst van 71%
Terugwinning van reagentia Terugwinning van DEAE-cellulose: na centrifugeren wordt het neerslag gekookt met water, gefiltreerd op zijden doek van 100 mesh, verschillende keren herhaald totdat het filtraat helder is, vervolgens gewassen met 0,5 mol/1 HCI, 0,5 mol/1 NaOH en water, en gedroogd. Het terugwinningspercentage is 95%. De 80 C-fractie werd verzameld door directe destillatie van een ethanolische waterige oplossing gewonnen uit de waterige Yichun-oplossing. Voeg vervolgens vast natriumchloride toe tot verzadiging en ga door met destilleren. . 70% kan worden toegevoegd. Nadat het natriumchloride in de fles is verdampt, kan het ook via een klep worden gevuld.
Agarose poederis een polysacharide gewonnen uit zeewier en is het hoofdbestanddeel van agar. Sinds de ontdekking ervan wordt het op veel terreinen gebruikt vanwege zijn unieke fysische en chemische eigenschappen, zoals gelvormend vermogen, thermische stabiliteit, chemische stabiliteit en biocompatibiliteit. Hieronder volgt een gedetailleerde uitleg van het doel ervan:
Agarosegelelektroforese is een van de meest gebruikte scheidings- en analysetechnieken in de moleculaire biologie. Als medium voor gelelektroforese heeft agarose de voordelen van een grote poriegrootte, een breed scheidingsbereik en een eenvoudige bediening. Tijdens het elektroforeseproces migreren biologische macromoleculen zoals DNA, RNA of eiwit door de poriën van agarosegel onder invloed van een elektrisch veld. Vanwege de verschillen in lading, grootte en vorm van verschillende moleculen is hun migratiesnelheid in gel verschillend, waardoor scheiding wordt bereikt. Agarosegelelektroforese wordt veel gebruikt bij het klonen van genen, analyse van genexpressie en detectie van genmutaties. Het wordt vaak gebruikt als drager of matrix in celcultuur. Vanwege de uitstekende biocompatibiliteit en chemische stabiliteit kan agarose een stabiele groeiomgeving voor cellen bieden. In het kolonievormingsexperiment met zachte agar wordt bijvoorbeeld agarose gebruikt om half-vast kweekmedium te bereiden om het kolonievormingsvermogen van cellen te detecteren, wat van groot belang is voor het evalueren van de mate van kwaadaardige transformatie van cellen.
Bovendien kan agarose ook worden gecombineerd met andere biomaterialen om composietsteigermaterialen te bereiden voor gebruik in weefselmanipulatie en regeneratieve geneeskunde. Agarosegel speelt ook een belangrijke rol bij immunodiffusie en immuno-elektroforese. Bij deze technologieën kan agarosegel, als medium voor antigeen- en antilichaamreactie, duidelijke precipitatielijnen of ringen vormen, die kunnen worden gebruikt om de aanwezigheid en concentratie van antigeen of antilichaam te detecteren en analyseren. De poriegrootte en ladingseigenschap van agarosegel kunnen de diffusiesnelheid en bindingsefficiëntie van antigeen en antilichaam beïnvloeden, zodat de experimentele omstandigheden kunnen worden geoptimaliseerd door de concentratie en het type agarose aan te passen.
Toepassing in moleculaire biologie-experimenten
Agarosegelelektroforese kan niet alleen worden gebruikt om DNA en RNA te scheiden, maar kan ook worden gecombineerd met andere technologieën om de zuivering ervan te bereiken. Tijdens het proces van DNA-extractie kan bijvoorbeeld agarosegelelektroforese worden gebruikt om de integriteit en zuiverheid van DNA te detecteren, en vervolgens kan het doel-DNA-segment van de gel worden gescheiden door gelsnijden en terugwinnen. Deze methode heeft de voordelen van eenvoudige bediening en een hoog herstelpercentage. Bij nucleïnezuurhybridisatie-experimenten kan agarosegel worden gebruikt als drager in de vaste fase om DNA- of RNA-probes op de gel te fixeren en vervolgens te hybridiseren met het gelabelde doelnucleïnezuur. Door de aanwezigheid en intensiteit van hybridisatiesignalen te detecteren, kunnen de aanwezigheid en concentratie van doelnucleïnezuren worden bepaald.
De poriegrootte en ladingseigenschap van agarosegel kunnen de bindingsefficiëntie van probe- en doelnucleïnezuur beïnvloeden, zodat de hybridisatieomstandigheden kunnen worden geoptimaliseerd door de concentratie en het type agarose aan te passen. Polymerasekettingreactie (PCR) is een van de meest gebruikte technieken in de moleculaire biologie voor het amplificeren van DNA. Bij de analyse van PCR-producten is agarosegelelektroforese een van de meest gebruikte methoden. Door PCR-producten te scheiden door middel van elektroforese, kunnen de grootte en zuiverheid van de geamplificeerde fragmenten worden gedetecteerd, waardoor wordt bepaald of de PCR-reactie succesvol is en of er niet-specifieke amplificatieproblemen zijn.
Hoewel de poriegrootte van agarosegel relatief groot is, is deze niet geschikt voor het scheiden van kleine moleculaire eiwitten, maar kan hij in sommige gevallen toch worden gebruikt voor eiwitscheiding en -zuivering. Bij preparatieve gelelektroforese kan agarosegel bijvoorbeeld worden gebruikt om eiwitten met grotere molecuulgewichten te scheiden en te zuiveren. Bovendien kan agarose ook worden gecombineerd met andere materialen om composietgel te bereiden om het scheidingsbereik ervan uit te breiden en de scheidingsefficiëntie te verbeteren. Bij sommige experimenten voor het bepalen van de enzymactiviteit kan agarosegel worden gebruikt als drager voor enzymimmobilisatie. Immobilisatie van het enzym op agarosegel kan de activiteit en stabiliteit van het enzym handhaven en de scheiding en terugwinning van het enzym uit de reactanten vergemakkelijken. Deze methode heeft brede toepassingen op het gebied van enzymengineering.
Toepassing in de microbiologie
Agarose wordt vaak gebruikt als stollingsmiddel in microbiële kweekmedia. Vergeleken met agar heeft agarose een hogere zuiverheid en een lager gehalte aan onzuiverheden, waardoor het geschikter is voor microbiële teelt. Wanneer u een vast kweekmedium bereidt, lost u agarose op in heet water, voegt u vervolgens andere voedingsstoffen en antibiotica toe en koelt u af om een vast kweekmedium te vormen. Dit type kweekmedium kan een stabiele groeiomgeving voor micro-organismen bieden, waardoor hun isolatie, zuivering en identificatie wordt vergemakkelijkt. Bij microbiologische identificatie-experimenten kan agarosegel worden gebruikt om specifieke identificatiemedia te bereiden. Bij het identificeren van darmbacteriën kan bijvoorbeeld een agarosekweekmedium met specifieke suikers worden gebruikt om verschillende soorten bacteriën te onderscheiden door hun fermentatie van suikers te observeren. Bovendien kan agarosegel ook worden gebruikt om biochemische reactiemedia voor micro-organismen te bereiden om hun metabolische kenmerken en enzymactiviteiten te detecteren.
Agarose poederwordt over het algemeen verwarmd tot boven de 90 graden om op te lossen in water, en wanneer de temperatuur daalt tot 35-40 graden, vormt het een goede halfvaste gel, wat het belangrijkste kenmerk en de basis is van de verschillende toepassingen. De prestatie van agarosegel wordt gewoonlijk uitgedrukt door de sterkte van de gel. Hoe hoger de sterkte, hoe beter de prestaties van de gel. De gel van agarose wordt veroorzaakt door het bestaan van waterstofbruggen. Elke factor die de waterstofbruggen kan vernietigen, kan leiden tot de vernietiging van gel. Agarose is hydrofiel en vrijwel volledig vrij van geladen groepen. Het veroorzaakt zelden denaturatie en adsorptie aan gevoelige biologische macromoleculen. Het is een ideale inerte drager. Tijdens het bereidingsproces van agarose is het noodzakelijk om de agarpectine zoveel mogelijk te verwijderen, anders kan er een zeer kleine hoeveelheid sulfaat en pyrodruivenzuur zijn om de ioniserende groep in agarose te vervangen, wat elektro-osmose (EEO) zal veroorzaken en de beweging van deeltjes zal beïnvloeden. Het sulfaatgehalte van agarose van goede kwaliteit is relatief laag, meestal minder dan 0,2%, en de elektro-osmose is relatief klein, meestal minder dan 0,13. Dit is de reden waarom agarose zo duur is dan agar.
In 1937 scheidde Araki voor het eerst agarose van agar, maar pas in 1961 ontdekte Hjertin voor het eerst de uitstekende prestaties van agarose, trok het steeds meer aandacht en begon hij met de industriële productie. Agarose wordt veel gebruikt in klinische tests, biochemische analyse en scheiding van biomacromoleculen.
Agarosepoeder is een fundamenteel hulpmiddel in de moleculaire biologie en biotechnologie, met een breed scala aan toepassingen in gelelektroforese, affiniteitschromatografie, immunodiffusie en immuno-elektroforese. De unieke eigenschappen, zoals gebruiksgemak, veelzijdigheid, lage toxiciteit en kosteneffectiviteit, maken het tot een onmisbaar onderdeel van laboratoriumonderzoek. Ondanks de beperkingen ervan, zoals beperkte resolutie en broosheid, hebben recente ontwikkelingen in de agarosegeltechnologie, waaronder gels met hoge-resolutie, voor-gegoten gels en op agarose-gebaseerde microfluïdische apparaten, de bruikbaarheid ervan vergroot en de prestaties ervan verbeterd. Naarmate het wetenschappelijk onderzoek zich blijft ontwikkelen, zal agarosepoeder ongetwijfeld een waardevol en essentieel reagens blijven in de toolkit voor moleculaire biologie en biotechnologie.
Populaire tags: agarosepoeder cas 9012-36-6, leveranciers, fabrikanten, fabriek, groothandel, kopen, prijs, bulk, te koop