Janus Groen B, Engelse naam Janus Green, molecuulformule C30H31ClN6, CAS 2869-83-2, is een groen vast poeder bij kamertemperatuur en druk. Het lijkt oplosbaar te zijn in water, maar enigszins oplosbaar in organische oplosmiddelen in alcohol. Het heeft een hoge oplosbaarheid in water, vooral wanneer opgelost in heet water, en ziet er blauw uit. Het is ook enigszins oplosbaar in alcoholoplosmiddelen. Deze eigenschap maakt het mogelijk om snel te diffunderen en te kleuren in biologische monsters. Het is een specifiek levend kleurmiddel dat kan worden gebruikt voor levende kleuring van mitochondriën, kleuring van schimmels en protozoën, kleuring van embryosecties, maar ook voor redoxindicatoren en kopergalvanisatieadditieven. Het heeft goede toepassingen op fundamentele onderzoeksgebieden zoals biochemie en fluorescerende kleurstoffen. De moleculaire structuur bevat azokleurstoffen, waardoor het een effectieve organische kleurstof is. De positieve lading in zijn moleculaire structuur zorgt er ook voor dat het een bepaalde toepassingswaarde heeft bij galvanische materialen.
|
|
|
|
Chemische formule |
C30H31ClN6+ |
|
Exacte massa |
510 |
|
Moleculair gewicht |
511 |
|
m/z |
510 (100.0%), 511 (32.4%), 512 (32.0%), 513 |
|
Elementaire analyse |
C, 70,51; H, 6,11; N, 16,44; Kl, 6,94 |
Janus Groen Bheeft als belangrijke biologische kleurstof een breed scala aan toepassingen op meerdere gebieden.
1. In vivo kleuring van mitochondriën
Het meest bekende- gebruik is als een mitochondriaal specifiek levend kleurmiddel. Mitochondria zijn de ‘energiefabrieken’ in cellen, die verantwoordelijk zijn voor de productie van energiemoleculen zoals ATP om de cellulaire levensactiviteiten in stand te houden. Het kan specifiek mitochondria kleuren, waardoor ze onder een krachtige microscoop blauw{3}}groen lijken, terwijl het cytoplasma vrijwel kleurloos is. Deze kleuringseigenschap stelt onderzoekers in staat de verdeling, morfologie en hoeveelheid mitochondriën in cellen duidelijk te observeren, wat van groot belang is voor het bestuderen van de functie, het metabolisme en de relatie met ziekten van mitochondriën.
2. Kleuring van schimmels en protozoa
Naast mitochondriale kleuring kan het ook worden gebruikt voor het kleuren van schimmels en protozoa. Schimmels en protozoa zijn belangrijke objecten in biologisch en medisch onderzoek, en hun morfologie, structuur en fysiologische kenmerken zijn cruciaal voor het begrijpen van levensprocessen en ziektemechanismen. Dankzij de kleureigenschappen zijn deze kleine organismen gemakkelijker te observeren en te identificeren onder een microscoop, wat een sterke ondersteuning biedt voor gerelateerd onderzoek.
3. Kleuring van embryosecties
In ontwikkelingsbiologie en embryologisch onderzoek is het kleuren van embryosecties een belangrijk middel om het proces van embryo-ontwikkeling en structurele veranderingen te begrijpen. Het kan worden gebruikt voor het kleuren van embryocoupes om onderzoekers te helpen de cellulaire weefselstructuur en morfologische kenmerken van embryo's in verschillende ontwikkelingsstadia te observeren en analyseren. Dit is van groot belang voor het begrijpen van de regulerende mechanismen van de embryonale ontwikkeling, het optreden van genetische ziekten en reproductieve gezondheidsproblemen.
4. Redox-indicator
Het heeft ook de functie van een indicator voor oxidatie-reductie. Bij chemische reacties gaan de oxidatie- en reductietoestanden van stoffen vaak gepaard met kleurveranderingen. Onder verschillende redoxtoestanden zal het verschillende kleuren vertonen en kan daarom worden gebruikt als indicator voor redoxreacties. Deze eigenschap zorgt ervoor dat het potentiële toepassingswaarde heeft op gebieden als chemische analyse, milieumonitoring en de voedingsindustrie.
Uitgaande van 4-amino-N, N-diethylaniline of p-fenyleendiamine (dat N,N-diethylaniline bevat), wordt methyleenviolet 3RAX verkregen door cyclisatie met aniline in aanwezigheid van een oxidatiemiddel. Vervolgens,Janus Groen Bwordt bereid door diazotering en koppelingsreactie.
Uitgangsmateriaal: Ervan uitgaande dat we 4-amino-N, N-diethylaniline als belangrijkste uitgangsmateriaal gebruiken. Het geval van p-fenyleendiamine (dat N, N-diethylaniline bevat) kan aanvullende stappen vereisen om het gewenste N,N-diethylgesubstitueerde p-fenyleendiamine te scheiden of te synthetiseren, maar hier concentreren we ons op het geval van een enkel uitgangsmateriaal.
Doel: 4-amino-N, N-diethylaniline cycliseren met aniline of andere geschikte verbindingen om een benzoheterocyclische structuur te vormen vergelijkbaar met methyleenviolet 3RAX. Ten eerste wordt 4-amino-N,N-diethylaniline omgezet in een gemakkelijker cycliseerbaar tussenproduct via bepaalde middelen zoals acylering, condensatie, enz., en vervolgens wordt het tussenproduct gecycliseerd met aniline.
Voorbeeldreactie (niet direct, alleen ter illustratie):
Acyleringsreactie (vorming van een amidetussenproduct): 4-amino-N,N-diethylaniline reageert met acylchloride of anhydride om het overeenkomstige amide te produceren.
4-amino-N, N-diethylaniline+acylchloride → amidetussenproduct+HCl
Ringreactie (hypothese): Het amidetussenproduct wordt gecycliseerd met aniline onder katalysator- en/of verwarmingsomstandigheden.
Amide tussenproduct+aniline → tussenproduct vergelijkbaar met methyleenviolet 3RAX
Doel: Ervoor zorgen dat het tussenproduct aromatische primaire aminen bevat voor daaropvolgende diazoteringsreacties.
Voorbeeldreactie (als het tussenproduct al een aromatisch primair amine is, sla deze stap dan over):
Als het tussenproduct geen aromatisch primair amine is, moet het mogelijk worden omgezet in een aromatisch primair amine door middel van reductie, hydrolyse of andere reacties.
Niet-primair aminetussenproduct+reductiemiddel/hydrolysemiddel → aromatisch primair aminetussenproduct
Doel: Aromatische primaire aminetussenproducten omzetten in diazoniumzouten.
Chemische vergelijking:
Aromatisch primair amine tussenproduct+salpeterigzuur+zuur → diazoniumzout+water
Opmerking: De diazotiseringsreactie wordt gewoonlijk uitgevoerd bij lage temperaturen (zoals onder 0 graden C) en onder zure omstandigheden om de ontleding van diazoniumzouten te voorkomen.
Doel: Diazoniumzouten koppelen aan geschikte fenol- of aromatische amineverbindingen om Jianna Green B te vormen.
Chemische vergelijking (voorbeeld): diazoniumzouten+fenolische of aromatische amineverbindingen → C30H31ClN6+bij-producten
Opmerking: Koppelingsreacties worden gewoonlijk uitgevoerd onder alkalische omstandigheden om de vorming van koppelingsproducten te bevorderen. Het kiezen van de juiste fenolische of aromatische amineverbindingen is cruciaal voor het verkrijgen van het doelproduct, Jianna Green B.
Aanvullende stappen: zuivering en na-verwerking
Doel: Jianna Green B isoleren en zuiveren uit het reactiemengsel.
Methode: Dit kunnen technieken omvatten zoals oplosmiddelextractie, kristallisatie, herkristallisatie, chromatografische scheiding (zoals kolomchromatografie, dunnelaagchromatografie, HPLC, enz.).
Let op: zuiverings- en na{0}}naverwerkingsstappen zijn cruciaal voor het verkrijgen van doelproducten met hoge- zuiverheid. In het laboratorium moeten deze stappen mogelijk meerdere keren worden herhaald om de opbrengst en zuiverheid te optimaliseren.
Bij biologische experimentenJanus Groen Bwordt veel gebruikt als een veelgebruikt levend kleurmiddel om de morfologie en verdeling van mitochondriën te observeren. Dankzij de unieke kleuringseigenschappen zijn mitochondriën duidelijk te onderscheiden onder een microscoop, waardoor het een belangrijk hulpmiddel is bij celbiologisch onderzoek. Hieronder wordt uitgelegd hoe u een kwaliteitsfractie van 1% Jianna Green B-kleurstofoplossing kunt bereiden. Dit proces omvat niet alleen het nauwkeurig wegen en oplossen van chemische reagentia, maar ook het zorgvuldig overwegen van factoren zoals temperatuur en oplosmiddelkeuze om ervoor te zorgen dat de uiteindelijke kleurstofoplossing zowel stabiel als effectief is.
|
|
|
|
|
Experimentele voorbereiding
Materialen en reagentia
Jianna Green B-poeder: Zorg ervoor dat de gekochte Jianna Green B een hoge zuiverheid heeft en vrij is van onzuiverheden, wat de basis vormt voor het bereiden van kleuroplossingen van hoge-kwaliteit.
Fysiologische zoutoplossing: Fysiologische zoutoplossing, ook bekend als 0,9% natriumchlorideoplossing, wordt vaak gebruikt als oplosmiddel in biologische experimenten om schade aan cellen te verminderen, omdat de osmotische druk vergelijkbaar is met die van menselijke cellen. In dit experiment werd fysiologische zoutoplossing gebruikt als oplossingsmedium voor Jianna Green B.
Maatcilinder: gebruikt voor het nauwkeurig meten van fysiologische zoutoplossing.
Beker: Wordt gebruikt voor het oplossen van Jianna Green B-poeder.
Magnetische roerder (optioneel): Wordt gebruikt om het oplossingsproces te versnellen en ervoor te zorgen dat het poeder gelijkmatig in het oplosmiddel wordt verspreid.
Temperatuurmeter: wordt gebruikt om de temperatuur tijdens het oplossingsproces te bewaken en te regelen.
Elektronische balans: gebruikt voor het nauwkeurig wegen van Jianna Green B-poeder.
Maatkolf (optioneel): Als een hogere nauwkeurigheid gewenst is, kan voor de volumebepaling een maatkolf worden gebruikt. Maar bij deze eenvoudige bereidingswijze kunnen direct een bekerglas en een maatcilinder worden gebruikt.
Bruine glazen fles: wordt gebruikt om de bereide Jianna Green B-kleurstofoplossing te bewaren. De bruine fles kan de invloed van licht op de kleurstofoplossing voorkomen en de stabiliteit ervan behouden.
Veiligheidsbescherming
Draag laboratoriumjassen: Bescherm kleding tegen chemische verontreiniging.
Draag handschoenen:Voorkom direct huidcontact met chemische reagentia.
Draag een veiligheidsbril: Om te voorkomen dat de oplossing in de ogen spat.
Werken in een zuurkast: Zorg voor luchtcirculatie in het laboratorium en verminder de ophoping van schadelijke gassen.
Voorbereidingsstappen
Weeg nauwkeurig 0,5 g Jianna Green B-poeder af met behulp van een elektronische balans. Houd er rekening mee dat de balans vóór het wegen moet worden gekalibreerd om een nauwkeurige weging te garanderen.
Giet het afgewogen Jianna Green B-poeder voorzichtig in een schoon bekerglas om te voorkomen dat het poeder wegvliegt.
Meet nauwkeurig 50 ml fysiologische zoutoplossing af met behulp van een maatcilinder. Houd er rekening mee dat bij het meten de maatcilinder op een stabiel oppervlak moet worden geplaatst, met de zichtlijn op gelijke hoogte met het laagste punt van het vloeistofniveau, om een nauwkeurige meting te garanderen.
Giet de afgemeten fysiologische zoutoplossing langzaam in een bekerglas met Jianna Green B-poeder. Houd er rekening mee dat het langzaam langs de bekerwand moet worden gegoten om te voorkomen dat vloeistof spat of veel schuim ontstaat.
Roer de oplossing voorzichtig met een glazen staaf om het Jianna Green B-poeder op te lossen. Als de omstandigheden het toelaten, kan voor het roeren een magnetische roerder worden gebruikt om de oplossingsefficiëntie te verbeteren.
Let tijdens het roerproces op het observeren van de kleurverandering van de oplossing. Terwijl Jianna Green B oplost, moet de oplossing geleidelijk donkergroen of blauw-groen worden.
Vanwege de beperkte oplosbaarheid van Jianna Green B bij kamertemperatuur kan het bekerglas, om de oplossingsefficiëntie te verbeteren, in een waterbad worden verwarmd tot 30-40 graden Celsius. Houd er rekening mee dat de temperatuur tijdens het verwarmen niet te hoog mag zijn om schade aan de chemische structuur van Jianna Green B of overmatige verdamping van het oplosmiddel te voorkomen.
Blijf tijdens het verwarmingsproces de oplossing roeren totdat het Jianna Green B-poeder volledig is opgelost en de oplossing uniform en transparant wordt.
Controleer na het oplossen de kleur en transparantie van de oplossing. Als er onopgeloste deeltjes of een ongelijkmatige kleur in de oplossing zitten, moet het roeren of de juiste verwarming worden voortgezet totdat het probleem is opgelost.
Als het nodig is om de concentratie van de oplossing aan te passen, kan de hoeveelheid fysiologische zoutoplossing of Jianna Green B-poeder op passende wijze worden verhoogd of verlaagd, afhankelijk van de werkelijke situatie. Maar bij deze bereidingswijze hebben we het reagens nauwkeurig afgewogen op basis van een massafractie van 1%, waardoor er doorgaans geen extra aanpassingen nodig zijn.
Giet de bereide Jianna Green B-kleurstofoplossing in een bruine glazen fles en sluit deze goed af om besmetting en vervluchtiging te voorkomen.
Label de fles met de naam, concentratie, bereidingsdatum en gebruikersnaam van de kleurstofoplossing voor toekomstig gebruik en beheer.
Voorzorgsmaatregelen
Nauwkeurig wegen:
Het garanderen van de nauwkeurige meting van groen B-poeder en fysiologische zoutoplossing voor de gezondheid is de sleutel tot het bereiden van kleurstofoplossingen van hoge- kwaliteit.
01
Temperatuurregeling:
Tijdens het verwarmingsproces moet de temperatuur strikt worden gecontroleerd om nadelige effecten op de kwaliteit van de kleurstofoplossing, veroorzaakt door te hoge of lage temperaturen, te voorkomen.
02
Voldoende roeren:
Roeren is een belangrijke stap om ervoor te zorgen dat het groene B-poeder gelijkmatig wordt opgelost in fysiologische zoutoplossing, en moet worden voortgezet totdat de oplossing uniform en transparant wordt.
03
Veilige werking:
Volg strikt de laboratoriumveiligheidsvoorschriften gedurende het gehele voorbereidingsproces om de persoonlijke veiligheid en de veiligheid van de experimentele omgeving te garanderen.
04
Tijdig gebruik:
Langdurige opslag van de bereide kleurstofoplossing kan nog steeds leiden tot een afname van het verfeffect of andere chemische veranderingen. Het wordt aanbevolen om het zo snel mogelijk na de bereiding te gebruiken om het beste kleureffect te garanderen.
05
Veelgestelde vragen
1. Wat is Janus Green B?
Janus Green B is een kunstmatig gesynthetiseerde kleurstof op basis van fenazine-, die vaak wordt gebruikt bij biologische kleuring (zoals live kleuring van mitochondriën) en als indicator voor oxidatie-reductie.
2. Wat zijn de belangrijkste doeleinden?
Hoofdzakelijk gebruikt in biologische experimenten:
- Live kleuring van mitochondriën (aangezien het binnenmembraansysteem van mitochondriën deze in een kleurloze staat kan herstellen, waardoor de redoxactiviteit ervan zichtbaar wordt).
- Detectie van cellulaire ademhaling (als oxidatie--reductie-indicator geeft blauw de geoxideerde toestand aan, en kleurloos geeft de gereduceerde toestand aan).
- Het kan ook worden gebruikt als kleurstof voor zijde en leer in de industrie.
3. Wat is het principe van kleuring?
In mitochondriën wordt Janus Green B gereduceerd tot een kleurloos product door enzymen op het binnenmembraan (zoals cytochroom c-oxidase) in de mitochondriën; nadat het de mitochondriën heeft verlaten, wordt het opnieuw-door zuurstof geoxideerd tot een blauwe kleur. Deze omkeerbare redoxreactie maakt het mogelijk om specifiek de mitochondriale activiteit aan te geven.
4. Waar moet bij gebruik op worden gelet?
- De kleurstofconcentratie en -tijd moeten worden gecontroleerd (doorgaans 0,01%-0,02%) om overmatige kleuring te voorkomen die de celactiviteit kan verstoren.
- Voor sommige celtypen is het kleureffect mogelijk niet bevredigend. De omstandigheden moeten worden geoptimaliseerd.
- Bewaren in een donkere en afgesloten container om ontbinding te voorkomen.
Populaire tags: Janus Green B Cas 2869-83-2, leveranciers, fabrikanten, fabriek, groothandel, kopen, prijs, bulk, te koop