BIS-TRIS-buffer CAS 6976-37-0

Het is een efficiënte biologische buffer met een effectief pH-bufferbereik van 5,8-7,2 en een pKa-waarde van 6,5 (25 graden). In biochemische experimenten zijn veel biomoleculen, zoals eiwitten en nucleïnezuren, zeer gevoelig voor pH-waarden, en zelfs kleine veranderingen in de pH kunnen hun structuur en functie beïnvloeden. BIS-TRIS kan de pH-waarde van de oplossing binnen dit pH-bereik stabiliseren, waardoor een stabiele omgeving voor biochemische reacties ontstaat. Tijdens het proces van eiwitscheiding en -zuivering kan de natuurlijke conformatie van het eiwit worden gehandhaafd om denaturatie of neerslag als gevolg van pH-veranderingen te voorkomen.

Bij eiwitzuiveringstechnieken zoals ionenuitwisselingschromatografie en affiniteitschromatografie wordt bijvoorbeeld gebruik gemaakt vanBIS-TRIS-bufferkan ervoor zorgen dat de interactie tussen eiwitten en chromatografiemedia plaatsvindt onder stabiele pH-omstandigheden, waardoor de zuiveringsefficiëntie en zuiverheid worden verbeterd.

Bij testen op enzymactiviteit hangt de enzymactiviteit vaak af van een specifieke pH-omgeving. De pH-waarde van het reactiesysteem kan nauwkeurig worden geregeld om het enzym in staat te stellen katalytische activiteit uit te oefenen onder optimale pH-omstandigheden, waardoor de activiteit van het enzym nauwkeurig wordt gemeten. Dit is van groot belang voor het bestuderen van de eigenschappen, werkingsmechanismen en het ontwikkelen van enzympreparaten van enzymen.

BIS-TRIS heeft het vermogen om te coördineren met verschillende metaalionen en stabiele complexen te vormen, zoals Zn ² ⁺ - BIS-TRIS, Mn ² ⁺ - BIS-TRIS, enz. Deze metaalioncomplexen spelen een belangrijke rol in de studie van de structuur en functie van biomoleculen. Bij de structurele analyse van eiwitten fungeren metaalionen vaak als cofactoren om deel te nemen bij de vorming van actieve centra in eiwitten. Door BIS-TRIS te coördineren met metaalionen kan de structuur van eiwitmetaalioncomplexen worden gestabiliseerd, waardoor het gemakkelijker wordt om technieken zoals röntgenkristallografie en nucleaire magnetische resonantie (NMR) te gebruiken voor structurele analyse.

De actieve centra van bepaalde zinkbevattende enzymen hebben bijvoorbeeld zinkionen nodig om hun katalytische activiteit te behouden, en BIS-TRIS Zn ² ⁺-complexen kunnen een stabiele structurele omgeving voor deze enzymen bieden, wat helpt om hun drie- dimensionale structuren nauwkeurig te analyseren.

Bij nucleïnezuuronderzoek zoals DNA-sequencing kunnen metaalionen ook betrokken zijn bij de vouwing en functionele regulatie van nucleïnezuren. De coördinatie tussen BIS-TRIS en metaalionen kan de lokale omgeving van nucleïnezuren reguleren, waardoor de interacties tussen nucleïnezuren en eiwitten, kleine moleculen, enz. worden beïnvloed, waardoor een krachtig hulpmiddel ontstaat voor-diepgaand onderzoek naar de structuur en functie van nucleïnezuren.

BIS-TRIS heeft belangrijke toepassingen in eiwitelektroforese-experimenten. SDS-PAGE (natriumdodecylsulfaatpolyacrylamidegelelektroforese) en Native PAGE (niet-denaturerende polyacrylamidegelelektroforese) zijn gebruikelijke technieken voor eiwitelektroforese.BIS-TRIS-bufferwordt vaak gebruikt om elektroforesebuffer te bereiden om de pH-stabiliteit van de oplossing tijdens elektroforese te behouden. In SDS-PAGE worden eiwitten gedenatureerd en negatief geladen in een monsterbuffer die SDS en mercaptoethanol bevat, en vervolgens gescheiden op moleculaire grootte in polyacrylamidegel.

Het kan de stabiliteit van de pH-waarde van de elektroforesebuffer garanderen, waardoor eiwitten op de verwachte manier in een elektrisch veld kunnen migreren, waardoor eiwitten met verschillende molecuulgewichten nauwkeurig worden gescheiden en hun relatieve molecuulgewichten worden gedetecteerd.

In Native PAGE behouden eiwitten hun natuurlijke conformatie voor elektroforetische scheiding. Het gebruik ervan kan denaturatie van eiwitten als gevolg van pH-veranderingen voorkomen, de natuurlijke activiteit en conformationele informatie van eiwitten behouden en helpen bij het bestuderen van de natuurlijke toestand en interacties van eiwitten.

Western blotting is een belangrijke experimentele techniek die wordt gebruikt om het expressieniveau van doeleiwitten te detecteren. Bis Tris-propaanbuffer wordt vaak gebruikt als eiwittransportbuffer bij immunoblotting-experimenten.

Tijdens de overdracht van eiwit van gel naar het membraan kan Bis Tris-propaanbuffer een stabiele pH-omgeving handhaven, waardoor wordt gegarandeerd dat het eiwit met de juiste conformatie en ladingstoestand naar het membraan wordt overgebracht. Dit is cruciaal voor de daaropvolgende antilichaambinding en signaaldetectie.

Als eiwitten tijdens het overdrachtsproces denaturatie of conformationele veranderingen ondergaan, kan dit ervoor zorgen dat antilichamen het doeleiwit niet nauwkeurig kunnen herkennen, waardoor de nauwkeurigheid van experimentele resultaten wordt beïnvloed. Daarom speelt Bis Tris-propaanbuffer een cruciale rol bij immunoblotting-experimenten, waardoor de gevoeligheid en betrouwbaarheid van de experimenten wordt verbeterd.

Celkweek is een belangrijke technologie in biomedisch onderzoek en de pH-waarde van celkweekmedium heeft een aanzienlijke invloed op de celgroei en het metabolisme. BIS-TRIS propaanbuffer kan worden gebruikt voor de bereiding van celcultuurmedia om een ​​stabiele pH-waarde te behouden tijdens het celcultuurproces.

Verschillende soorten cellen hebben verschillende pH-vereisten, maar vereisen over het algemeen groei in een omgeving die dicht bij de fysiologische pH ligt (ongeveer 7,2-7,4).

BIS-TRIS propaanbuffer kan de pH-veranderingen van het kweekmedium tijdens celkweek bufferen, pH-schommelingen voorkomen die worden veroorzaakt door accumulatie van metabolische producten, gasuitwisseling en andere factoren, en een stabiele groeiomgeving voor cellen bieden. Dit is van groot belang voor de normale groei, proliferatie en functionele expressie van cellen, waardoor het succespercentage van celkweek en de betrouwbaarheid van experimentele resultaten wordt verbeterd.

Nucleïnezuurelektroforese is een veelgebruikte methode voor het detecteren van de lengte en concentratie van doelnucleïnezuren, waaronder DNA- en RNA-elektroforese. Geschikt voor nucleïnezuurelektroforese-experimenten, het kan de pH-stabiliteit van de elektroforesebuffer handhaven.

Bij nucleïnezuurelektroforese migreren nucleïnezuurmoleculen onder invloed van een elektrisch veld op basis van hun grootte en ladingseigenschappen.

Het kan de stabiliteit van de pH-waarde van de oplossing tijdens elektroforese garanderen, waardoor nucleïnezuurmoleculen op de verwachte manier kunnen migreren, waardoor nucleïnezuurfragmenten van verschillende lengte nauwkeurig worden gescheiden en hun concentraties worden gedetecteerd. Dit is van groot belang voor onderzoek zoals genklonering, genexpressieanalyse en nucleïnezuursequencing.

BIS-TRIS kan ook worden gebruikt om creatinekinase te detecteren. Creatinekinase is een belangrijk enzym dat een cruciale rol speelt in het spierenergiemetabolisme. De bepaling van de activiteit ervan is van groot belang voor het diagnosticeren van spierziekten en het evalueren van sportblessures. In het detectie-experiment van creatinekinase kan de pH-stabiliteit van het reactiesysteem worden gehandhaafd om ervoor te zorgen dat het enzym katalytische activiteit vertoont onder optimale pH-omstandigheden. Door de pH-waarde nauwkeurig te regelen, kan de nauwkeurigheid en betrouwbaarheid van de meting van creatinekinase-activiteit worden verbeterd, wat een sterke ondersteuning biedt voor klinische diagnose en onderzoek.

BIS-TRIS speelt ook een belangrijke rol in het onderzoek en de toepassing van hemoglobine. Tijdens het scheidingsproces van hemoglobine kunnen de stabiliteit en activiteit ervan worden gehandhaafd om denaturatie of aggregatie als gevolg van pH-veranderingen te voorkomen. Dit is van grote betekenis voor de zuivering en het structuuronderzoek van hemoglobine.

BIS-TRIS kan hemoglobine effectief beschermen tijdens het vriesdroog-proces. Vriesdrogen is een veelgebruikte methode voor het conserveren van biologische producten, maar tijdens het invries- en droogproces kunnen eiwitten beschadigd raken. Het kan zorgen voor een stabiele omgeving voor hemoglobine tijdens het vriesdroogproces, de denaturatie en inactivatie van eiwitten verminderen en de activiteit en stabiliteit van hemoglobine na het vriesdrogen verbeteren.

IEF (iso-elektrische focusserende elektroforese) en 2-D-gelelektroforese zijn veelgebruikte technieken in proteomics-onderzoek, die worden gebruikt om complexe eiwitmengsels te scheiden en te analyseren. BIS-TRIS kan worden gebruikt als kathode-elektrolyt voor IEF/2-D-gelelektroforese.

Tijdens het IEF-proces migreren en concentreren eiwitten zich in een pH-gradiënt op basis van hun iso-elektrische punt. BIS-TRIS-katholyt kan de pH-stabiliteit van de elektroforesebuffer handhaven, waardoor wordt verzekerd dat eiwitten nauwkeurig naar hun iso-elektrische punt kunnen migreren tijdens het iso-elektrische focusproces. Bij 2D-gelelektroforese wordt gebruik gemaakt vanBIS-TRIS-bufferhelpt ook het scheidingseffect en de resolutie van eiwitten te verbeteren, waardoor gegevens van hoge-kwaliteit voor proteomisch onderzoek worden verkregen.